液氮罐在細胞培養過程中的使用

　　細胞培養的一般過程主要包括四個步驟:準備、材料提取、培養和冷凍復蘇。為了保存細胞，尤其是不易獲得的突變細胞或細胞株，應冷凍細胞。冷凍溫度一般采用196℃液氮溫度，將細胞收集到冷凍管中，加入含有保護劑(一般為二甲基亞或甘油)的培養基，冷卻速度一定，后儲存在液氮罐中。在低的溫度下，細胞的保存時間幾乎是無限的。

　　胚胎冷凍保存技術

　　胚胎冷凍保存技術是指利用低溫保護劑在低溫條件下保存胚胎的技術。這項技術是由于人工授精技術在20世紀下半葉的廣泛應用而產生的。動物胚胎的冷凍保存原理是由于低溫降低了胚胎內的變質反應速度。溫度越低，胚胎保存時間越長。

　　目前研究了慢速冷凍、快速冷凍、一步冷凍、直接移植冷凍、玻璃化冷凍等多種胚胎冷凍保存方法。玻璃化冷凍法的步驟如下:

　?、僭谑覝叵聦⑴咛シ湃?5%的玻璃溶液(VS液)中進行預處理15分鐘。

　?、谠诟邼舛?75%190%)的VS液中保存預處理后的胚胎20-40分鐘。金鳳液氮罐

　?、蹖⒔涍^兩步抗凍處理的胚胎直接放入液氮中保存。金鳳液氮罐

　　另外，菌種、疫苗、骨組織、精子等物質也可以用液氮罐保存，都能達到良好的長期儲存效果。